An investigation of the possibility to replace the rabbit pyrogen test by an in vitro test | RIVM

Voor veel parenteraal toe te dienen geneesmiddelen dient partijgewijs te worden aangetoond dat zij niet pyrogeen (koortsverwekkend) zijn. De meest voorkomende pyrogene verontreinigingen in biologische en biotechnologische geneesmiddelen zijn bacteriele toxinen. Met name endotoxinen afkomstig van Gram-negatieve bacterien zijn bekend om hun pyrogene eigenschappen. De klassieke test voor de detectie van pyrogene activititeit is gebaseerd op vergelijking van de rectale temperatuur van konijnen, voor en na toediening van een te testen substantie. Circa twintig jaar geleden is een in vitro test op bacterieel endotoxine ontwikkeld, die voor veel geneesmiddelen kan dienen als alternatief voor de pyrogenentest: de zogenaamde LAL-test (Limulus Amoebocyten Lysaat test). De LAL-test kent echter een aantal beperkingen, waardoor het niet voor alle parenterale geneesmiddelen geschikt is als alternatief voor de pyrogenentest. Onderzoek is verricht naar de mogelijkheid een alternatieve in vitro pyrogenentest te ontwikkelen, die is gebaseerd op de in vitro productie van cytokines (IL-6 en TNFalfa) door een humane monocyten cellijn (MonoMac-6). De resultaten van het onderzoek wezen er op dat voor een aantal bacteriele vaccins zowel de test op bacterieel endotoxine als de bepaling van cytokine-afgifte door humane monocyten een goed alternatief kunnen vormen voor de pyrogenentest in konijnen.